Chlorophyll ist ein grüner Farbstoff, der in höheren Pflanzen und allen anderen photosynthetischen Organismen vorkommt. Chlorophyll A und Chlorophyll B sind in Ethanol, Ether und Aceton und anderen Lösungsmitteln löslich, unlöslich in Wasser und Petrolether, daher können polare Lösungsmittel wie Aceton, Methanol, Ethanol, Ethylacetat usw. verwendet werden, um Chlorophyll zu extrahieren.
Chlorophyll-Extraktionsprozess:
Die Chlorophyllextraktion wird in einem halbdunklen Raum bei 25 Grad C vorbereitet. Die Extraktionsschritte sind wie folgt:
(1) Nehmen Sie 1000 Gramm frische grüne Blätter und zerkleinern Sie sie in einem Wechsler.
(2) Legen Sie die zerkleinerten 1000 Gramm grünen Blätter in Aceton mit einer kleinen Menge Calciumcarbonat (Temperatur 20 Grad) zur Extraktion, bis die Blattfragmente nach dem Filtern und Reinigen farblos sind.
(3) Den filtrierten Acetonextrakt in einen Trichter geben, der 1 Liter Petrolether und 100 ml Aceton enthält, und dann vorsichtig rotieren lassen, während destilliertes Wasser bis zur Schichtung hinzugefügt wird. Die meisten Aceton- und wasserlöslichen Verunreinigungen in der Wasserschicht werden verworfen, wobei nur Petroletherlösung zurückbleibt.
(4) Nachdem die Petroletherlösung erneut mit destilliertem Wasser gereinigt wurde, wird sie mehr als fünfmal mit 200ml 80-prozentiger Methanollösung, die Petrolether und 0,01 g Oxalsäure enthält, gereinigt, und schließlich wird eine gelbgrüne Suspension erhalten .
(5) Die Suspension mit wasserfreiem Natriumsulfat trocknen und in eine Säule aus 3 cm dickem Saccharosepulver infiltrieren. Reinigen Sie dann die ausgefällten Pigmente, um Carotinoide zu entfernen und sie nur noch natürliches Chlorophyll enthalten zu lassen.
(6) Saccharosesäule, die natürliches Chlorophyll enthält, ist in zwei Schichten unterteilt, die grüne Schicht hat 4-10 mm Chlorophyll B-Schicht, die andere blaue Schicht ist 2-6 mm Chlorophyll A-Schicht.
(7) Der in der Mitte der blauen Schicht befindliche Teil (etwa die Hälfte der blauen Schicht) wird in Ether gegeben, die Suspension wird filtriert und extrahiert, mit destilliertem Wasser gereinigt, mit Natriumsulfat getrocknet und mit Utensilien filtriert, um Chlorophyll zu erhalten A.
(8) Entfernen Sie den mittleren Teil der grünen Schicht in (6) und geben Sie ihn schnell in den Ether zum Filtern und Waschen, um eine Chlorophyll-B-Ether-Lösung herzustellen.
Wie wird während der Extraktion getrennt?
Die Chromatographie ist eine wichtige Methode zur Trennung, Reinigung und Identifizierung organischer Verbindungen, die insbesondere in der Mikroanalytik weit verbreitet ist. Zu den Pigmenten in Obst und Gemüse gehören hauptsächlich fettlösliches Carotin, Lutein, Chlorophyll und wasserlösliche Anthocyane. In Extraktionsexperimenten können wir das Prinzip der ähnlichen Mischbarkeit wasserlöslicher Anthocyaninfilterung nutzen, die wiederum Dünnschichtchromatographie, Säulenchromatographie, Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC) zur Trennung von Beta-Carotin, Lutein, nutzen kann und Chlorophyll, geschwächt aufgrund der Polarität der drei Pigmentarten wiederum, kann in geeigneter Weise ein einzelnes organisches Lösungsmittel oder ein unterschiedliches Verhältnis von gemischtem Lösungsmittel als Treibmittel und Elutionsmittel gewählt werden. Die optimalen Trennbedingungen wurden bestimmt.
